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L'objectif de cette etude etait d'optimiser une methode de marquage fluorochromique par microscopie a epifluorescence pour des milieux liquides et de l'adapter aux milieux solides pour le denombrement de bacteries soumises a des chocs osmotiques et thermiques. L'optimisation de ces methodes a necessite la validation des denombrements par rapport a une methode de reference (methode de denombrement sur gelose). Apres denombrement par microscopie a epifluorescence, les resultats ont montre que les methodes d'epifluorescence etaient applicables aux milieux liquides avec des chocs osmotiques a 8 % de NaCl et avec des chocs thermiques a 60 DegreesC. Le pourcentage de bacteries a membrane endommagee est fonction de l'intensite du choc et un fluorochrome (DAPI) permet de connaitre la population totale. L'association de differents fluorochromes et d'une methode de denombrement sur milieu gelose ameliore considerablement la comprehension de l'evolution d'une population bacterienne soumise a un choc, en termes de population totale et de cellules endommagees.

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9783838180403

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